DNA片段化分析
DNA降解也是细胞凋亡的典型标志之一,其降解产物可分为两种,即高分子量的单链DNA缺口以及低分子量DNA片断(单链及寡聚核小体)。
单链DNA缺口有特定的检测方法,即利用酶催化,将特定核酸标记到游离的3'-OH末端,这种方法被称为TUNEL。Roche提供的基于TUNEL法的In Situ Cell Death Kit, fluorescein(11684795910)能够在组织及单细胞中检测到低水平的凋亡,灵敏度高,背景干扰小,且能通过后续的流式、荧光显微镜、光学显微镜检测对细胞凋亡进行定量。
在凋亡细胞的细胞质中出现的组蛋白联合的DNA片断(单链及寡聚小体),可使用Cell Death Detection ELISA PLUS(11774425001)高通量地检测细胞死亡,或使用Apoptotic DNA-Ladder Kit(11835246001)通过纯化及琼脂糖电泳分析这些呈现出典型的ladder状态的DNA片断。